组织学技术是一门对人体或动物进行微纽结构观察,将形态学理论具体化、真实化的科学。神经纤维髓鞘漏斗膜一一施兰(Sehmidt一Lonterman)氏切迹,在有的孩料里价绍是用切片法,其结果观察样品不大理想,即施兰氏切迹一一漏斗膜看不出完整立体的漏斗形状,就连有的图谱中施兰氏切迹,也观察不出较理想的漏斗膜。近年来我们运用了“有髓神经分离标本神经髓梢漏斗膜显示法”.用此法所分离出标本不仅显示出了神经纤维的髓鞘,而更主要的是显示出了产罄的漏斗膜,并有立体感。现将方法介绍如下,供同道们参考。
方法
1、取材:取狗、猫的坐骨神经。
2、固定:固定于下液内24小时,即甲醛6毫升,毗吮10毫升,硝酸钠0.5克,蒸馏水40毫升。
3、冲洗:流水冲洗24小时,除去甲醛和毗咤。
4、放入0.7%硝酸银中36一48小时。
5、以下液还原6小时,对苯二酚1克、甲醛5毫升,无水亚硫酸钠0.25克,蒸馏水80毫升。
6、水洗:蒸馏水洗,入存甘油保存。
7、用解剖分离针分离神经,放在载玻片上进行封固。
8、封固。运用二重封片法(即先用一个盖玻片去压载玻片代有甘油的神经纤维,而后在此盖片上盖一个大盖玻片用树胶封固。
结果
髓鞘呈淡黄色、漏斗膜褐色~黑色,并有明显的立体感。
讨论
1、选材很重要,猫比狗的材料好,我们应用狗的材料多次,都不如用猫的清晰可见。
2、运用镀银法,所以一切用器一定要用洗涤液浸泡后方能使用,否则,影响结果的显示。
3、封固时一定先将小盖片周围多余的甘油擦去,然后再滴上树胶封固,否则混浊不清。
4、经多次反复实践验证,此法简单,容易掌握。髓鞘、漏斗膜、郎鼎氏等均明显可见。
主要参考文献
(1)杜单民:实用组织学技术,1981;179
(2)彩色组织学图谱,南京医学院组胚教研组、上海第二医学院组胚教研室,人民卫生出版社,1981
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