糖皮质激素在临床上有着十分广泛的应用,但是长期大量地使用糖皮质激素就会导致HPA轴的负反馈调节长期发生,造成HPA轴的正常调节功能降低,肾上腺皮质出现萎缩。突然停药或减量幅度过大就会使HPA轴功能低下状态暴露出来,表现出一系列肾阳虚的症状。本研究以肾阳虚大鼠为模型,采用艾灸不同配穴对HPA轴的不同影响,探讨不同配穴处方之间治疗差异,寻求最佳治疗方案。
1材料与方法
1.1实验动物
健康 sD大鼠, 40只,体重200 1 15g-造模前适应性喂养7d,明暗周期1211,自由饮食饮水,室内温度22一26 0(;,湿度50%一60%。
1.2动物分组
40只sD大鼠编号并按随机数字表法分为五组,每组8只,分别为空白组对照组、模型组、艾灸1组(‘肾俞、。元),艾灸2组(‘肾俞、足三里),艾灸3组(。元、足三里。
1.3药物试剂
氢化可的松注射液(20mL: O.lg,哈药集团三精制药股份有限公司,批号:H23021662 ) ;大鼠皮质酮( (:ORT )酶联免疫试剂盒(武汉新启迪生物科技有限公司);大鼠促肾上腺皮质激素( A(:TH )酶联免疫试剂盒(武汉新启迪生物科技有限公司。
1.4实验仪器
电子天平(JY5002型,上海精密科学仪器有限公司生产);电子天平(Bs223s型,北京赛多利斯仪器系统有统公司生产);电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂生产);微量移液器(美国热电公司生产);酶标仪(anthos2010型);自制艾灸条(直径3mm长度7cm );自动洗板机(PT-DR}'320型,J匕京普天新桥技术有限公司。
1.5模型复制
参照文献并加以改进。模型组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组大鼠于每日称量后按照每公斤体重注射25mg的标准在大鼠的双后肢肌肉注射氢化可的松,注射时注意两后肢的注射量保持一致,造模连续进行14d。
1.6干预方法
造模完成后,艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组,大鼠穴位处剃毛,每日固定后用自制的细艾条施温和灸。每穴灸Smin, 1次//d,连续灸14d-艾灸1组灸大鼠肾俞、。元两穴;艾灸2组灸肾俞、足三里两穴;艾灸3组灸。元、足三里两穴。大鼠的取穴标准参照《实验针灸学》[“〕牢白对照组、模型组,每日固定后不给予艾灸治疗。
1.7标本采集
实验第29d,所有大鼠从腹主动脉采血,放人试管中静置20min,使用离心机分离血清。A(:TH、皮质酮在辽宁中医药大学实验室进行测定。
1.8指标检测
采用酶联免疫吸附法(ELhA)分别对大鼠血清中ACTH、皮质酮的含量进行检测。
1.9统计分析
采用sPSS19.0统计软件,A(:TH、皮质醇含量采用均值士标准差(.x士s)表示,组间比较用F分析和t检验,计数资料采用x检验。
2结果
2.1模型检测与空白对照组比较,造模后模型组大鼠的A(:TH、皮质酮含量明显降低(PG0.05 ),见表上A(:TH与空白对照组比较,模型(下转第125页〕(上接第81页)组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组A(:TH含量明显降低(PG0.05 ),艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组大鼠的A(:TH含量相对于模型组有较大提高(PG 0.05 ),艾灸1组相对于艾灸2组、艾灸3组提高幅度最大(P G 0.05 ),艾灸2组与艾灸3组A(:TH的含量相差不大(P G 0.05)。
2.2皮质酮与空白对照组比较,模型组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组皮质酮含量明显降低(PG0.05 ),艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组大鼠的皮质酮含量相对于模型组有较大提高(P G 0.05),艾灸1组相对于艾灸2组、艾灸3组提高幅度最大(P G 0.05),艾灸2组与艾灸3组皮质酮的含量相差不多(P G 0.05 )。
3讨论
中医认为糖皮质激素属于纯阳之品,接受激素治疗的患者可以视为过服温热之药,热药伤阴可导致阴虚症状的出现。阴不足不能化生阳气而导致阳亦虚。激素治疗的撤减阶段,外来热药减少,体内阳衰之寒象自然显现。故在激素治疗阶段主要以阴虚火旺为主,间或存在阴虚夹湿热或气阴两虚夹湿热,患者表现出以热为主症状。在激素撤减阶段,患者的辨证则以肾阳虚为主,但也有少数患者表现为阴阳两虚症状。现代研究认为HPA轴与中医学的肾有密切联系,肾阳虚的病人有垂体一肾上腺皮质系统兴奋低下现象,实验证实了HPA轴系统功能紊乱是肾阳虚发病原理中的一个重要环节。
肾俞是肾的背俞穴,功善补肾温阳;。元为小肠募穴、足三阴与任脉交会穴,元气所存之处。功专培肾固本,补益元气,温中散寒。足三里为胃经合穴,胃的下合穴,能调和气血,具有补虚强壮的功能,主治范围极广本实验结果表明艾灸的确能够有效地改善大鼠因使用大量糖皮质激素所导致的HPA轴抑制状态。在3个艾灸治疗组中,肾俞、。元组的效果最佳。元以补气为主,肾俞以补阳为主;。穴相伍,同走下焦,培补元气、补肾温阳之功更佳。
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